Urée-tryptophane

Le milieu Urée-tryptophane, improprement nommé urée-indole est un milieu de culture synthétique utilisé en bactériologie donnant la possibilité la mise en évidence simultanée ...



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Milieu de culture - Bactériologie

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Le milieu Urée-tryptophane, improprement nommé urée-indole est un milieu de culture synthétique utilisé en bactériologie donnant la possibilité la mise en évidence simultanée :

Composition

- L-tryptophane ...............................  3 g
- Urée ........................................ 20 g
- Monophydrogénophosphate de potassium ........  1 g
- Dihydrogénophosphate de potassium ...........  1 g
- Chlorure de sodium ..........................  5 g
- Éthanol à 95 °GL ............................ 10 ml
- Rouge de phénol ............................. 25 mg
- Eau distillée (qsp) .........................  1 l

Préparation

resultats envisageables

à stériliser par filtration (utiliser de l'eau stérile pour limiter la contamination d'origine).

Lecture

Production d'indole

La réaction d'hydrolyse du tryptophane, catalysée par la tryptophanase, produit de l'indole, de l'acide pyruvique et de l'ammoniac selon l'équation suivante :

L'indole produit est mis en évidence par le réactif de Kovacs. Le diméthylamino-4-benzaldéhyde réagit avec l'indole avec formation d'un composé rouge.

Hydrolyse de l'urée

Elle est catalysée par l'uréase, il y a production de dioxyde de carbone et d'ammoniac. Ce dernier alcalinise le milieu. Cette alcalinisation du milieu est mise en évidence par le virage du rouge de phénol au rose.

H_{2}N - CO - NH_{2} + H_{2}O \longrightarrow  \vec{CO_{2}} + \vec2{NH_{3}}

Désaminsation du tryptophane

Consulter l'article à propos de la tryptophane désaminase.

L'acide indole-pyruvique est mis en évidence par sa complexation en un composé marron foncé en présence d'ions fer III (ferriques, Fe3 +).

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