Tryptone sulfite néomycine
Milieu pour la détection et l'énumération de Clostridium perfringens.
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- La gélose Tryptone - Sulfite - Néomycine (TSN) avait été recommandée par Mossel et ... Mettre en suspension 40, 0 g de milieu déshydraté (BK001) dans 1 litre d'eau.... The influence of temperature on the growth of Clostridium perfringens.... (source : solabia)
- Format de fichier : Rich Text Format - Milieu TSN. Tryptone - sulfite -cyclosérine. Tryptone sulfite néomycine... noires (réduction des sulfites), Identification envisageable de Clostridium perfringens... (source : pedagogie.ac-montpellier)
- TYPE DE MILIEU. Nutritif sélectif. CONSERVATION. 15-25°C. DOMAINE. D'APPLICATION... L'agar à la tryptone, au sulfite ainsi qu'à la néomycine est axé sur la forte tolérance de Clostridium... Clostridium perfringens forme des colonies noires.... (source : fr.vwr)
Milieu pour la détection et l'énumération de Clostridium perfringens.
Composition
Composant | Qté (g/L) |
---|---|
Peptone trypsique | 10 |
NaCl | 5 |
Extrait de viande | 2 |
Extrait de levure | 5 |
Chlorhydrate de cystéine (rend le milieu particulièrement réducteur) | 0, 3 |
Agar | 15 % |
Mode d'action
Le milieu TSN est une gélose sélective, elle exploite le fait que Clostridium perfringens est résistant à la polymyxine, la néomycine (antibiotiques) et qu'il a le pouvoir de diminuer les sulfites. La croissance des autres Clostridia sulfito réducteurs est presque complètement inhibée car la flore d'accompagnement est beaucoup supprimée. Ce milieu contient 1 critère de différenciation : le sulfite de sodium dont la réduction est révélée par fer (précipitation du sulfure de fer), forme une colonie noire. La température d'incubation sert à sélectionner : - à 37°C → dénombrement des formes végétatives de Cl. perfringens. - à 46°C → dénombrement de Clostridium perfringens. L'incubation se fait en anaérobiose.
ensemencement
se placer en milieu stérile : hôtte ou bec Bunsen
réaliser la dilution indispensable en eau physiologique ou dans du tampon PBS
introduire 1 mL de la suspension bactérienne dans une boite de petri stérile
ajouter 15 mL de gélose en surfusion (46°C)
laisser la gélose se solifier
couler une double couche (10 mL de gélose)
placer la boite de pétri dans une jarre hermétiquement fermée contenant un réactif générateur d'une atmosphère anaérobie (acide ascorbique par exemple) et un témoin de cette atmosphère modifiée incuber la jarre à 37°C ou 46°C pendant 18 à 24 heures
les colonies produisant un pigment noir diffusible sont des bactéries anaérobies sulfito réductrices et peut-être clostridium perfringens.
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Milieu de culture - Bactériologie
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